为了向最广泛的教育工作者提供支持，我们准备了一份标准清单可向 NEB 申请用于实验室课程的试剂。要发起您的请求，请下载并填写课程支持订购表，然后通过电子邮件将其发回给我们。为了便于考虑，您的请求必须附有课程大纲或协议副本，注明每种请求的试剂将在何处使用。

我们恳请您在请求的数量上切合实际，以便该程序可以广泛使用，尤其是在那些原本不会 b 的机构中e 能够提供此说明。 NEB 保留限制将发送哪些试剂以及发送多少试剂的权利。

我们希望您在课程中取得成功。

目前，人们对古细菌复制蛋白如何作为复制体复合物协同工作以实现快速高效的基因组复制知之甚少。我们的目标是了解单个复制体成分，包括 B 和 D 家族 DNA 聚合酶、解旋酶和辅助蛋白，以及它们如何协同工作以开始复制、合成染色体和终止。此外，我们有兴趣发现对复制动力学重要的新复制因子。

我们的目标是了解DNA 聚合酶合成和保真度的分子基础。图为 DNA 多聚体的三维结构模型merase（来自 Andrew F. Gardner、Kiserian M. Jackson、Madeleine M. Boyle、Jackson A. Buss、Vladimir Potapov、Alexandra M. Gehring、Kelly M. Zatopek、Ivan R. Corrêa, Jr.、Jennifer L. Ong 和William E. Jack (2019) Therminator DNA Polymerase: Modified Nucleotides and Unnatural Substrates. Front Mol Biosci. 6:28.doi: 10.3389/fmolb.2019.00028)

产品描述

1）6.5 小时后即可得可见菌落

2）质粒携带氨苄抗性，5 分钟完成转化实验

3）克隆毒性基因

4）无动物来源产品

5）抗 T1 噬菌体感染（fhuA2）

6）该产品还同时提供电转级感受态细胞

概述：该 E.coli 感受态细胞适用于高效级转化且菌落生长迅速。

基因型：F´proA+B+ lacIq ΔlacZM15/ fhuA2 Δ(lac-proAB)glnV zgb-210::Tn10 (TetR) endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5

特性：

1）通过 lacI q 精确控制表达，从而允许克隆潜在的毒性基因

2）在琼脂糖平板上有最高的培养效率，转化 6.5 小时后即能得到可见菌落

3）挑取过夜培养的单菌落，培养 4 个小时后即进行DNA 的提取

4）可做蓝/白斑筛选

5）缺失非特异性核酸内切酶 I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒

转化效率：

高效级：1–3 X 109 cfu/μg pUC19 DNA

电转级：> 1 X 1010 cfu/μg pUC19 DNA

未被转化的细胞需要检测抗 Φ80 噬菌体感染的能力，这是检测抗 T1 噬菌体感染能力的标准检测法。此外，未转化细胞还要检测其对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素和四环素的敏感性。结果显示这些未被转化的细胞抗呋喃妥因。使用 pUC 19质粒通过对 β－半乳糖基因的 α 互补分析显示：这些细胞也适宜进行蓝/白斑筛选。

随产品提供：

20ml SOC Outgrowth 培养基(室温贮存)

0.025 ml 50 pg/μl pUC19 对照 DNA(–20°C贮存)

注意事项：感受态细胞应贮存于–80°C，一旦融化，就不能再被冻存。–20°C贮存会显著降低其转化效率。只要温度高于–80°C，即使未被融化，细胞转化效率也会降低为零。