NEB E.coli DNA 连接酶 200U

来自 : 发布时间：2024-05-07

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NEB 建议根据扩增子GC 含量百分比选择您的OneTaq 缓冲液。

AMPLICON %GC 内容推荐默认缓冲液优化说明<50% GCOneTaq 标准反应缓冲液*调整退火温度、引物/模板50-65% GCOneTaq Standard Reaction Buffer*OneTaq GC Reaction Buffer 可用于增强困难扩增子的性能。>65% GCOneTaq GC Reaction Buffer*OneTaq GC Reaction Buffer with10-20% OneTaq High GC Enhancercan be用于增强困难扩增子的性能。

* 也可提供无镁配方。

HomeFormsOEM & Customized Solutions 客户反馈OEM & Customized Solutions 客户反馈主页试剂和分子生物学产品PCR、qPCR 和扩增技术产品核苷酸溶液产品 核苷酸解决方案产品列表产品概述New England Biolabs 提供精选的高纯度核苷酸，用于 DNA 和 RNA 聚合酶。选择产品：核苷酸解决方案TP) Solution SetClosedGTP SolutionClosedUTP SolutionClose核糖核苷酸溶液SetCloseRibonucleotide Solution MixSubmit Restocking OrderIneligible item added to cart

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继续主页工具与资源使用指南核苷酸物理特性核苷酸物理特性化合物分子量（道尔顿）λmax（pH 7.0）λmax 1 M 溶液（pH 7.0）下的吸光度ATP507.225915,400CTP483.22719,000 GTP523.225313,700UTP484.2 26210,000dATP491.225915, 200dCTP467.22719,300dGTP507.225313,700dTTP482.22679,600主页工具与资源使用指南核酸数据核酸数据

DNA 碱基对的平均重量（钠盐）= 650 道尔顿

1.0 A260 单位 ds DNA = 50 µg/ml = 0.15 mM（核苷酸）1.0 A260单位 ss DNA = 33 µg/ml = 0.10 mM（核苷酸） 1.0 A260 单位 ss RNA = 40 µg/ml = 0.11 mM（核苷酸）

双链 DNA 分子的 MW = (#碱基对）X（650 道尔顿/碱基对）双链 DNA 分子末端的摩尔数 = 2 X（DNA 克数）/（MW，以道尔顿为单位）限制性核酸内切酶切割产生的末端摩尔数：a) 环状 DNA 分子: 2 X（DNA 摩尔数）X（位点数）b) 线性 DNA 分子：2 X（DNA 摩尔数）X（位点数）+ 2 X（DNA 摩尔数）

1 µg 1000 bp DNA = 1.52 pmol = 9.1 X 1011 分子 1 µg pUC18/19 DNA (2686 bp) = 0.57 pmol = 3.4 X 1011 分子 1 µg pBR322 DNA (4361 bp) = 0.35 pmol = 2.1 X 1011 分子 1 µg M13mp18/19 DNA (7249 bp) = 0.21 pmol = 1.3 X 1011 分子 1 µg λ DNA (48502 bp) = 0.03pmol = 1.8 X 1010 分子

1 pmol 的 1000 bp DNA = 0.66 µg 1 pmol pUC18/19 DNA (2686 bp) = 1.77 µg 1 pmol pBR322 DNA (4361 bp) = 2.88 µg 1 pmol M13mp18/19 DNA (7249 bp) = 4.78 µg 1 pmol λ DNA (48502 bp) = 32.01 µg

1.0 kb DNA = 333 个氨基酸的编码能力 @ 37,000 道尔顿蛋白质 10,000 道尔顿蛋白质 @ 270 bp DNA 50,000 道尔顿蛋白质 @ 1.35 kb DNA

产品描述

特性

Okayama 和 Berg 用于 cDNA 克隆

概述催化双链 DNA 粘性末端的 5´-磷酸和 3´-羟基形成磷酸二酯键。

来源纯化自重组 E.coli 594（su-）菌株，该菌株携带有噬菌体 λgt4 lop11 lig + Sam 7。

反应条件1 X  E. coli  DNA  连接酶缓冲液 [30 mM Tris-HCl（pH 8.0），4 mM MgCl2，1 mM DTT，26 μM NAD+，50 μg/ml BSA]。最适反应温度为16 ℃。

质保声明E. coli DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义1 单位指在 20 μl 反应体系中，在 16 ℃反应条件下，30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的 λDNA 片段 [5 端浓度为 0.12 μM （300 μg/ml）] 连接所需的酶量。

浓度10,000 units/ml。

热失活65°C 20分钟。

注意事项与 rATP 作辅因子的其它连接酶不同，本酶要求NAD+（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）作辅因子。

 

该酶对平齐末端片段的连接效率极低，平齐末端的连接请用 T4 DNA 连接酶。

 

不要用于将 RNA 连接至 DNA。